Модульные нанотранспортеры, способные вызывать внутриклеточную деградацию N-белка вируса SARS-CoV-2 в клетках А549 с временной экспрессией этого белка, слитого с флуоресцентным белком mRuby3

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Созданы модульные нанотранспортеры (МНТ), содержащие антителоподобную молекулу, монободи, к N-белку вируса SARS-CoV-2, а также аминокислотную последовательность, привлекающую Е3-лигазу Keap1 (Е3BP). В данный МНТ также был введен сайт отщепления E3BP-монободи от МНТ в кислых эндоцитозных компартментах. Показано, что данное отщепление эндосомной протеазой катепсином В приводит к увеличению сродства E3BP-монободи к N-белку в 2.7 раза. На клетках А549 с временной экспрессией N-белка, слитого с флуоресцентным белком mRuby3, было показано, что инкубация с МНТ приводит к достоверному уменьшению флуоресценции mRuby3. Предполагается, что разработанные МНТ могут служить основой для создания новых противовирусных препаратов против вируса SARS-CoV-2.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Ю. В. Храмцов

Институт биологии гена Российской академии наук

Автор, ответственный за переписку.
Email: alsobolev@yandex.ru
Россия, Москва

А. В. Уласов

Институт биологии гена Российской академии наук

Email: alsobolev@yandex.ru
Россия, Москва

Т. Н. Лупанова

Институт биологии гена Российской академии наук

Email: alsobolev@yandex.ru
Россия, Москва

Г. П. Георгиев

Институт биологии гена Российской академии наук

Email: alsobolev@yandex.ru

академик

Россия, Москва

А. С. Соболев

Институт биологии гена Российской академии наук; Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова

Email: alsobolev@yandex.ru

член-корреспондент

Россия, Москва; Москва

Список литературы

  1. Clercq E.D., Li G. // Clin Microbiol Rev. 2016. V. 29. P. 695–747.
  2. Gebauer M., Skerra A. // Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2020. V. 60. P. 391-415.
  3. Shipunova V.O., Deyev S.M. // Acta Naturae. 2022. V. 14. № 1(52). P. 54–72.
  4. Tolmachev V.M., Chernov V.I., Deyev S.M. // Russ Chem Rev. 2022. V. 91. № 3. RCR5034
  5. Surjit M., Lal S.K. // Infect Genet Evol. 2008. V. 8. P. 397–405.
  6. Wu C., Zheng M. // Preprints. 2020. 2020020247.
  7. Prajapat M., Sarma P., Shekhar N., et al. // Indian J Pharmacol. 2020. V. 52. P. 56.
  8. Du Y., Zhang T., Meng X., et al. // Preprints. 2020. doi: 10.21203/rs.3.rs-25828/v1.
  9. Khramtsov Y.V., Ulasov A.V., Lupanova T.N., et al. // Dokl Biochem Biophys. 2023. V. 510. P. 87–90.
  10. Lu M., Liu T., Jiao Q. et al. // Eur J Med Chem. 2018. V. 146. P. 251–259.
  11. Fulcher L.J., Hutchinson L.D., Macartney T.J., et al. // Open biology. 2017. V. 7. 170066.
  12. Slastnikova T.A., Rosenkranz A.A., Khramtsov Y.V., et al. // Drug Des Devel Ther. 2017. V. 11. P. 1315–1334.
  13. Khramtsov Y.V., Ulasov A.V., Lupanova T.N., et al. // Dokl Biochem Biophys. 2022. V. 506.
  14. Kern H.B., Srinivasan S., Convertine A.J., et al. // Mol Pharmaceutics. 2017. V. 14(5). P. 1450–1459.
  15. Wang S., Dai T., Qin Z., et al. // Nat. Cell Biol. 2021. V. 23. P. 718–732.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Зависимости относительной интенсивности флуоресценции (за 100% принята интенсивность флуоресценции до начала термофореза) через 20 с после начала термофореза от концентрации МНТ1 или расщепленного МНТ1 при постоянной концентрации N-белка, меченного AF488 (5 нМ). Указана стандартная ошибка определения относительной интенсивности флуоресценции (14–17 повторов).

Скачать (61KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Относительная флуоресценция клеток А549 (флуоресценция клеток, к которым не добавлялся МНТ была принята за 100%) при их инкубации различные времена с 500 нМ МНТ1 или 500 нМ МНТ0. Указаны средние значения с соответствующей среднеквадратичной ошибкой (n = 3–9).

Скачать (47KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024